PCR产物测序
--利用核酸外切酶 I和热敏磷酸酶去除引物和dNTPs

去除引物和dNTPs试试核酸外切酶 I和热敏磷酸酶！

PCR反应完毕后，产物里通常还混有PCR引物和过量的dNTPs--如果产物还要进行测序，那你一定要去除它们！

通常我们采用胶回收的方法提纯PCR产物，可是胶回收法不仅成本高，麻烦，而且还意味着一定量的产物损失。

现在，你可以利用NEB提供的核酸外切酶 I和热敏磷酸酶简单、方便地去除多余的引物和dNTPs。

实验步骤：

1. 取出7.5 μl PCR反应混合物；
2. 在反应混合物中加入0.5 μl (10 units)的核酸外切酶 I (20,000 units/ml), 37°C反应15分钟;
3. 再加入1μl的10× AP Buffer 和1μl (5 units) 热敏磷酸酶，37°C反应15分钟;如果反应时间延长，可减少酶用量，需试验验证。
4. 热失活核酸外切酶 I和热敏磷酸酶:80°C保温20分钟，终止反应。
5. 反应物可直接用于测序。

相关产品订货信息
核酸外切酶 I
M0293V 1,500 units 310.00 元
M0293S 3,000 units 696.00 元
M0293L 15,000 units 2,784.00 元

热敏磷酸酶
M0289V 500 units 310.00 元
M0289S 1,000 units 696.00 元
M0289L 5,000 units 2,784.00 元

以上两种产品的详细信息请参阅本目录修饰酶章节

M-MuLV反转录酶
M0253V 5,000 units 310.00 元
M0253S 10,000 units 696.00 元
M0253L 50,000 units 2,784.00 元

M-MuLV反转录酶(RNase H- )
M0248V 5,000 units 750.00 元
M0248S 10,000 units 1,260.00 元
M0248L 50,000 units 6,000.00 元

以上两种产品的详细信息请参阅本目录嗜温聚合酶章节