| Pl-Sce I (VDE) | 
 
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描述: 编码Pl-Sce I 的内含肽存在于Saccharomyces cerevisiae的VMA ATPase 基因中(1,5)。该基因经T7 RNA聚合酶表达系统修饰，可以在E. coli 菌株中独立表达(2)。(See more about Homing endonucleases)
来源: 重组E. coli菌株，克隆有Saccharomyces cerevisiae的 VMA1 ATPase 基因(2)。
反应缓冲液: (随酶提供) PI-Sce I Buffer + BSA
100 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT (pH 8.6 @
25°C)。 加入 25 µg/ml BSA。 37°C温育。
连接和再切: 经过PI-Sce I 10倍过量消化 , 超过95%的DNA片段能够被该酶连接和再切。
特性: 该内切酶的靶序列或识别位点如下所示：
5' ... ATCTATGTCGGGTGC^GGAGAAAGAGGTAATGAAATGGCA ... 3'
3' ... TAGATACAGCC^CACG CCTC TTTCTCCATTACTTTACCGT ... 5'
单位定义：1个单位指50 µl反?µ逑抵校?7°C条件下3小时酶解1 µg Xmn I线型化的pBSvdeX DNA所需要的酶量。
浓度: 1,000 到 5,000 units/ml.
贮存条件: 200 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA 和50%甘油。贮存于 -20°C。
稀释兼容性: 稀释液 B
热失活: 65°C 20 分钟。
注意事项: 归位内切酶没有严格定义的识别序列。
参考文献:
1. Hirata, R, et al. (1990) J. Biol. Chem. 265, 6726-6733.
2. Gimble, F.S. Thorner, J. (1992) Nature 357, 301-306
3. Gimble, F.S. et al.(1993) J. Biol. Chem. 268, 21844-21853.
4. Bremer, M.C.D. et al.(1992) Nucleic Acids Res. 20, 5484.
5. Kane, P.M. et al.(1990) Science 250, 651-657.