PI-Psp I

描述: PI-Psp I 是从一种E. coli菌株纯化获得的，该E. coli菌株表达来自于极度嗜热菌Pyrococcus species GB-D的DNA聚合酶(1)。PI-Psp I 归位内切酶是一个多肽前体体内蛋白质自剪切的产物，自剪切还产生一个聚合酶。(See more about Homing endonucleases)

来源: 重组E. coli菌株，该菌株克隆有来自Pyrococcus species的 PI-Psp I 基因。

反应缓冲液: (随酶提供) PI-Psp I Buffer + BSA
150 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT (pH 8.6 @ 65°C)。 加入 100 µg/ml BSA. 65°C温育。

连接和再切: 经过PI-Psp I 5倍过量消化 , 超过95%的DNA片段能够被该酶连接和再切。

特性: 该内切酶的靶序列或识别位点如下所示：

5' ... TGGCAAACAGCTATTAT^GGGTATTATGGGT ...3'
3' ... ACCGTTTGTCGAT^AATACCCATAATACCCA ...5'

单位定义：1个单位指100 µl反应体系中，在65°C条件下1小时完全解旋2 µg Xmn I线性化pAKR7所需要的量。

浓度: 1,000 到 5,000 units/ml.

贮存条件: 200 mM KCl, 10mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA和50%甘油。 贮存于 -20°C。

稀释兼容性: 稀释液 B

热失活: 无

注意事项: 归位内切酶没有严谨的识别序列。37°C温育时的活性不到10%。

参考文献:
1. Xu, Ming-Qun, et al. (1993) Cell 75, 1371.
2. Davis, T.B., unpublished observations.