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3' ... C C G C G^G ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,包含克隆于 Kluyvera ascorbata (C. Polisson) 的 Kas I 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 2 + BSA 连接和再切: 经过 Kas I 15倍过量消化,超过95%的DNA片段能够被连接和再切。 浓度: 4,000 units/ml (通过 pBR322 DNA鉴定 )。 贮存条件: 300 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 1 mM MgCl2, 200 µg/ml BSA, 50% 甘油。 贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 B 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: Kas I 是 Nar I 和 Sfo I的同裂酶。 Kas I 产生一个 4碱基的 5′ 突出端,而 Nar I 产生一个2碱基的 5′ 突出端。 Kas I 具有明显的位点倾向性,切割lambda DNA的活性是切割pBR322 DNA活性的25倍。 CpG甲基化阻断对哺乳动物基因组DNA的切割。 |
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