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3' ... G G A G (N)6^ ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,包含克隆于Moraxella nonliquefaciens (ATCC 17953) 的 Mnl I 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 2 + BSA 连接和再切: 经过Mnl I 2倍过量消化 , 大约50%的DNA片段能够被连接,连接的片段中超过95% 能被再切。 浓度: 5,000 units/ml (通过 lambda DNA鉴定 )。 贮存条件: 200 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 500 µg/ml BSA, 50%甘油。 贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 B 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: Mnl I 产生的DNA片段含有一个碱基的3′ 突出端,它要比平末端更难连接。更有效的连接可以通过使用Quick ligation kit(NEB#M2200V)来完成。对dam、dcm和哺乳动物CpG甲基化不敏感。 |
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