Hph I
#R0158V 200 units 289.00 元
#R0158S 400 units 569.00 元
#R0158L 2,000 units 2549.00 元
     
   NEBuffer 1 2 3 4
   % Activity  NR 75 0 100
5' ... G G T G A(N)8^ ... 3'
3' ... C C A C T(N)
7^ ... 5'

来源: 重组E. coli菌株,包含克隆于Haemophilus parahaemolyticus (ATCC 49700) 的 Hph I 基因。

反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 4
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 1 mM DTT (pH 7.9 @ 25°C)。 37°C温育。

连接和再切: 经过 Hph I 3倍过量消化,约50%的DNA片段能够被连接,连接的片段中超过95% 能被再切。

浓度: 5,000 units/ml (通过 lambda DNA鉴定)。

贮存条件: 300 mM NaCl, 10mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA, 50%甘油。 贮存于 -20°C。

稀释兼容性: 稀释液 B

热失活: 65°C 20 分钟。

注意事项: 酶活性被重叠的dam甲基化所阻断。

识别位点和切割位点之间的序列决定了Hph I 可能在N9或N8位切割 (Kang, C. Wu, C.-W. (1987) Nucl. Acids Res. 15, 2279-2294; Cho, S.-H. Kang, C. (1990) Mol. Cells 1, 81-86.)。该酶切割fX174 DNA时,如果酶量大于12单位,时间超过4小时,会产生额外的切割产物。但对于其它种DNA,还没有表现这种现象。但是,低pH和高甘油浓度能够增加上述现象出现频率。