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3' ... C C A C T(N)7^ ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,包含克隆于Haemophilus parahaemolyticus (ATCC 49700) 的 Hph I 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 4 连接和再切: 经过 Hph I 3倍过量消化,约50%的DNA片段能够被连接,连接的片段中超过95% 能被再切。 浓度: 5,000 units/ml (通过 lambda DNA鉴定)。 贮存条件: 300 mM NaCl, 10mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA, 50%甘油。 贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 B 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: 酶活性被重叠的dam甲基化所阻断。 识别位点和切割位点之间的序列决定了Hph I 可能在N9或N8位切割 (Kang, C. Wu, C.-W. (1987) Nucl. Acids Res. 15, 2279-2294; Cho, S.-H. Kang, C. (1990) Mol. Cells 1, 81-86.)。该酶切割fX174 DNA时,如果酶量大于12单位,时间超过4小时,会产生额外的切割产物。但对于其它种DNA,还没有表现这种现象。但是,低pH和高甘油浓度能够增加上述现象出现频率。 |
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