|
|
3' ... C T T C T(N)7^ ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,含有克隆自Moraxella bovis (ATCC 10900) 的 Mbo II 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 2 连接和再切: 经过Mbo II 10倍过量消化,大约50%的DNA片段能够被连接,连接的片段中超过95% 能被再切。 浓度: 5,000 units/ml (通过lambda (dam-)DNA鉴定 )。 贮存条件: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA, 50%甘油。贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 A 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: 酶活性被交迭的dam甲基化所阻断。 Mbo II消化产生的DNA片段含有一个碱基的3′ 突出端,甚至比平末端更难连接,如要提高连接效率,可使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。Mbo II消化时间最好不要超过1小时。 |
||||||||||||||||||||||||||||||