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3' ... ^G T A C ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,包含克隆于Neisseria lactamica (NRCC 2118) 的 Nla III 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 4 + BSA 连接和再切: 经过 Nla III 15倍过量消化,超过95%的DNA片段能够被连接和再切。 浓度: 10,000 units/ml (通过 fX174 DNA鉴定 )。 贮存条件: 200 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 500 µg/ml BSA, 50%甘油。 贮存于 -70°C。 稀释兼容性: 稀释液 B 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: 若长期保存,建议温度控制在 -70°C。Nla III的半衰期在-70°C时是6个月。该酶切割产生一个 3′ CATG突出端,能够与Sph I切割产生的(GCATG/C) DNA连接。由于Nla III的不稳定性,建议温育时间不要超过3小时。NaCl 和 KCl 抑制酶活性,(NH4)2SO4不抑制酶活性。 对dam、 dcm 和哺乳动物CpG甲基化不敏感。 |
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