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3' ... C C T A C (N)13^ ... 5' 来源: 重组E. coli菌株,克隆有Flavobacterium okeanokoites (IFO l 2536) 的Fok I 基因。 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 4 连接和再切: 经过Fok I 10倍过量消化,超过95%的DNA片段能够被连接和再切。 浓度: 4,000 units/ml (通过 lambda DNA鉴定)。 贮存条件: 50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA, 50%甘油。 贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 A 热失活: 65°C 20 分钟。 注意事项: 事实上,只用按照将被切割的序列构建一对互补的寡核苷酸,Fok I 可以在任意两个核苷酸之间进行切割(Szybalski, W. (1985) Gene 40, 169-173, Podhajska, A. -Szybalski, W. (1985) Gene 40, 175-182)。不推荐如下处理:酶量超过5 单位 Fok I 每 µg DNA的过量消化和温育时间超过2小时。 对dam,dcm或哺乳动物CpG甲基化不敏感。
Fok I crystals (Ira Schildkraut and Lydia Dorner, New England Biolabs) |
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