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3' ... C T C^G C C ... 5' 来源: Bacillus stearothermophilus CPW 193 (Z. Chen) 反应缓冲液: (随酶提供) NEBuffer 2 连接和再切: 由于BsrB I识别的是非回文序列, 经过BsrB I 10倍过量消化后,大约75%的DNA片段能够被连接,连接的片段中50% 能被再切。 剩下的片段能被SacI或Sac II切开。 浓度: 10,000 units/ml (通过 lambda DNA鉴定)。 贮存条件: 100 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA, 50% 甘油。 贮存于 -20°C。 稀释兼容性: 稀释液 A 热失活: 80°C 20 分钟。 注意事项: 由于BsrB I 的识别位点是非回文结构,当DNA经过BsrB I切割后再连接时,仅有50%的连接位点能够重新产生BsrB I 位点。BsrB I 在50°C时被完全激活。未能被 BsrB I 重新切割的连接位点,能够被 Sac I或 Sac II所切割。 对哺乳动物CpG甲基化敏感。 |
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