M-MuLV 反转录酶 (RNase H-) (M-MuLV Reverse Transcriptase (RNase H-))

• 重组酶
• 以单链DNA或RNA为模板合成cDNA
• 随酶提供10×缓冲液

产品说明：RNase H缺陷型莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MuLV）反转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA（合成cDNA时）或单链DNA做模板由引物起始合成一个互补的DNA链（1-3）。RNase H活性的缺失增强了该酶合成长链cDNAs的能力(4)。

来源： 编码M-MuLV反转录酶的基因在重组大肠杆菌中表达。在该酶RNase H区域含一个点突变，使修饰后酶的RNase H活性缺失，但反转录功能不受影响。

贮存溶液：150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH 7.6), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% NP-40和50%甘油。

反应缓冲液：1× Reverse Transcriptase Reaction Buffer
75 mM KCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.3）， 3 mM MgCl₂，10 mM DTT，加入dNTPs（不随酶提供）。37°C或42°C温育。

单位定义：以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位。

活性检测条件：75 mM KCl, 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl₂, 10 mM DTT, 0.5 mM [³H]-dTTP, 0.4 mM poly(rA)和oligo(dT)12-18。

质保声明：本品无核酸内切酶、外切酶和RNase污染。

cDNA合成：在50µl 反应体系中，用200单位的酶反应1小时，可以由粗提或纯化的RNA模板合成全长至9 kb的cDNAs。

浓度：200,000 units/ml。

参考文献：
1. Verma, I. M. (1975) J. Virol. 15, 843-854.
2. Gerard, G. F. and Grandgenett, D. P. (1975) J. Virol. 15, 785-797.
3. Roth, M. J., Tanese, N. and Goff, S. P. (1985) J. Biol. Chem. 260, 9326-9335.
4. Sambrook, J., Fritsch, E. F. and Maniatis, T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2nd ed.), (pp. 5.52-5.55, 8.11-8.17). Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press.