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下载: 技术简报,
Ph.D.-7 使用说明书,
Ph.D.-12 使用说明书, 噬菌体表面展示技术(Phage display)原理: 噬菌体表面展示技术是一种对多肽功能非常有效的筛选技术,即将外源蛋白分子或多肽的基因克隆到丝状噬菌体基因组中,与噬菌体外膜蛋白融合表达,展示在噬菌体颗粒的表面。由于外源蛋白或多肽的基因型和表型统一在同一噬菌体颗粒内,因此,通过表型筛选就可以获得它的编码基因。基于生物分子与药物靶分子(抗体、受体、抗原、酶的底物等)的亲和力,应用噬菌体表面展示技术可以从多肽库中进行快速筛选,从而成为药物开发的强有力工具。 NEB提供了3种随机肽库和供自制肽库所需的M13KE克隆展示载体。这3种肽库包括7肽库(Ph.D.-7),12肽库(Ph.D.-12)和抑制二硫键的7环肽库(Ph.D.-C7C)。以上肽库含1.28×109个不同克隆,足以覆盖7肽的组合概率,但只能覆盖部分12肽的组合概率。Ph.D.-C7C随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。上述肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白pⅢ的N端,故每一个病毒粒子可以表达5个拷贝。Ph.D.-7 和Ph.D.-12肽库表达的展示肽就是展示肽本身,不含有其它额外氨基酸,但是Ph.D.-C7C表达的展示肽前含有丙氨酸和半胱氨酸。所有的肽库在展示肽和pⅢ之间的连接肽,是由甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-丝氨酸组成。 Ph.D.TM 试剂盒组成:
应用:
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