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RNAi概述

将双链RNA转到真核生物中,可以通过一个被称作“RNA干扰(RNAi)”的过程引起同源mRNA的特异性降解。RNAi被认为是进行模式生物功能基因组研究的一个强大工具。双链RNA在体内被加工成19-23bp大小的片段,这些片段被称为小片段干扰RNA(siRNA),并与许多胞内RNA诱导沉默复合物(RISC)蛋白形成协同作用。在siRNA 的指导下,RISC可以识别并降解目的mRNA。在哺乳动物细胞中进行RNAi研究,只能使用短siRNA片段,因为双链长RNA对细胞往往具有较强毒性。所使用的特异性siRNA可以通过化学合成、体内转录以及酶切双链长RNA而获得。

 

RNAi相关产品

HiScribeTM RNAi 转录试剂盒
ShortCutTM RNAi 试剂盒

ShortCutTM siRNA Mix

是一组已被证实能产生高效基因沉默的混合物,是采用NEB独有的ShortCutTM RNaseIII技术制备的。每个混合物含有针对靶基因不同位置的特异性siRNA,可协同引起靶基因的沉默。因此这些siRNA Mix可在较低浓度(1-20 mM)下发挥作用,这样也避免了可能产生的非特异性反应。每种混合物所选用的mRNA序列与其它基因没有显著同源性。

ShortCutTM siRNA Mix以溶液状态提供,可直接用于转染。每100μl的包装,如果使用浓度为10 nM,可用于200次24孔板培养细胞的转染反应。NEB正在不断地研发新的siRNA Mix,请关注我们的英文网站 www.neb.com 或中文网站 www.neb-china.com 以获取最新信息。

ShortCutTM siRNA Mix优点:

  • 低浓度(1-20 nM)即可高效沉默靶基因
  • 对内源性靶基因也有效
  • 溶液状态提供,可直接用于转染

     
A) 15% TBE聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示, PTEN siRNA 混合物(约15 ng)的分子量与21bp和25bp合成的siRNA分子量标准大小极为接近。
B) 采用抗PTEN抗体Western blot分析分别转染Lit28i对照(-)和PTEN shortCut siRNA 混合物(+)的Hela细胞,结果显示转染7.5 nM的PTEN shortCut siRNA 混合物可有效沉默目的基因的表达。

ShortCutTM RNAi Mix

激酶信号
Akt1/2/3 激酶
MSK1 激酶,
Erk2 激酶
p38 MAP 激酶
血小板衍生生长因子受体β
PKR
PTEN

转录/染色质调控
CREB
DAX1
Dnmt1
Dnmt3B
雌激素受体α
雌激素受体β
p53
Rb

蛋白翻译加工
Furin
La 抗原

细胞凋亡
Caspase-3

报告基因/对照
eGFP
萤火虫荧光素酶
海肾荧光素酶
Lit28i Polylinker
MBP Control
荧光素-siRNA 转染对照

转染试剂

siRNA 转染试剂
TransPassTM R1 为将siRNA转染到哺乳动物细胞系而专门设计的多胺-脂质类高效转染试剂,TransPassTM R1具有低细胞毒性,因此在大多数转染实验后,可不必更换培养基。

TransPassTM R2 两种非脂质体转染试剂的复合物,是为将siRNA转染到一些比较难以转染的细胞系(如原代细胞、内皮细胞、淋巴细胞、肌肉细胞等)而专门设计的转染试剂。与常规的阳离子脂质体转染试剂相比,该试剂具有明显的低细胞毒性。

DNA 转染试剂
TransPassTM D1 阳离子脂质体转染试剂,可用于包括内皮细胞在内的许多哺乳动物细胞系的
DNA转染。当进行多个质粒的共转染时,也可获得较高的转染效率。该试剂以冰冻形式提供,使用前融化充分混匀。

TransPassTM D2 非阳离子脂质体转染试剂,可用于包括原代内皮细胞在内的许多哺乳动物细胞系的DNA转染。具有浓缩DNA和引起内源性渗透的特性,因此可提高转染效率。此外,在高效转染许多细胞系包括原代细胞时,所使用的最佳浓度下,TransPassTM D2具有低细胞毒性。

转染试剂相关产品

siRNA 转染试剂

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最后更新时间: Friday, 2007-03-30 14:08